大鼠深Ⅱ度燙傷合并創面感染模型的構建

目前，燙傷已成為日常生產及生活中最常見的意外損傷之一。據統計，我國每年每百萬人口中約有5000~10000人遭受燙傷。創面感染是燙傷后最常見、最嚴重的并發癥，引起創面感染的細菌主要為革蘭陰性桿菌，其中銅綠假單胞菌是最常見的致病菌之一。燙傷后創面感染如得不到及時救治，可能會引起嚴重后果，給患者帶來沉重的精神和經濟負擔，患者的病死率明顯升高。動物燙傷感染模型的成功構建在創面修復方面的研究以及表面藥物或敷料方面的研發中發揮著重要作用，因此，建立一種簡單易行、穩定性高、重復性好的燙傷感染模型具有重要意義。

模型建立

實驗材料與試劑：雄性清潔級SD大鼠，體重186~253g；銅綠假單胞菌ATCC27853；蒸汽掛燙機。

細菌菌懸液制備：將銅綠假單胞菌ATCC27853復蘇后接種于瓊脂培養基上，37℃恒溫培養18~20h，用接種環挑取菌落接種于血培養基上，繼續培養18~20h，采用稀釋法配制濃度為1X109CFU/mL的新鮮菌懸液。

燙傷創面感染模型制備：拔掉SP-CT/218T型蒸汽掛燙機噴頭，將容積50mL、開口直徑3cm的耐熱塑料管與導氣管對接并固定組成噴頭，在厚度2.5cm耐熱塑料板上做一個直徑3.0cm的圓形模具開口。選取SD大鼠。實驗前1天給予10g/L戊巴比妥鈉進行腹腔注射麻醉(40mg/kg)，麻醉后采用動物專用電剃刀剃去大鼠背部長毛，并給予80g/L硫化鈉進行脫毛。大鼠脫毛2h后將掛燙機預熱1min，待蒸汽溫度94℃，助手將直徑3cm模具置于大鼠背部待燙部位并固定，掛燙機噴頭垂直置于模具上方進行燙傷并計時，大鼠致傷時間點為8s，每只大鼠脊柱兩側分別致傷2個相同創面，燙傷30min待皮膚冷卻后，燙傷大鼠創面切痂，大鼠一側創面接種濃度為1X109CFU/mL的銅綠假單胞菌菌懸液0.3mL，另一側接種等體積生理鹽水作為對照組，以無菌紗布覆蓋創面，紗布邊緣與正常皮膚縫合固定。

創面情況：大鼠一般精神狀態可，進食好，眼部無分泌物。大鼠創面可見大量分泌物，惡臭味明顯，顯微鏡下可見彌漫性皮膚全層及肌層炎性細胞浸潤。

感染判斷標準：①無感染:傷口表面為血清痂殼，無紅腫熱痛，合攏自然，創面干燥，無滲出液。②輕微感染:傷口輕微腫脹，周圍充血、熱痛不明顯，無功能障礙，傷口自然收攏或輕微分開，表面潮濕，不伴有皮膚、肌肉的壞死。③明顯感染：紅熱腫痛明顯，存在功能障礙，多為軟組織壞死性感染，合并或不合并肌肉壞死。